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简析氨基酸分析仪的原理和操作步骤

时间:2022-06-10 点击:149次

  氨基酸分析仪是进行氨基酸分离、衍生和检测的全自动化专用分析仪器,广泛用于医药、食品、饲料、农业、育种、医学研究和地质考察等领域。根据柱后衍生原理设计而成,分为水解蛋白分析系统和生理体液分析系统,符合国际标准和国际仲裁标准。
 
  氨基酸分析仪的测定原理是利用样品各种氨基酸组分的结构不同、酸碱性、极性及分子大小不同,在阳离子交换柱上将它们分离,采用不同pH值离子浓度的缓冲液将各氨基酸组分依次洗脱下来,再逐个以路的茚三酮试剂混合,然后共同流至螺旋反应管中,于一定温度下(通常为115~120℃)进行显色反应,形成在570nm有最大吸收的蓝紫色产物。
 
  氨基酸分析仪的操作步骤
 
  1、样品处理
 
  (1)测定样品中各种游离氨基酸含量,可以除去脂肪杂质后,直接上柱进行分析。
 
  (2)测定蛋白质的氨基酸组成时样品必须经酸水解,使蛋白质完全变成氨基酸后才上柱进行分析。
 
  2、样品分析
 
  经过处理后的样品上柱进行分析。上柱的样品量根据所用自动分析仪的灵敏度来确定。一般为每种氨基酸0.1μmol左右。测定必须在pH5~5.5、100℃下进行,反应进行时间为10~15min,生成的紫色物质在570nm波长下进行比色测定。而生成的黄色化合物在440nm波长下进行比色测定。做一个氨基酸全分析一般只需1h左右,同时可将几十个样品一起装入仪器,自动按序分析,最后自动计算给出精确的数据。

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