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gpc凝胶净化的分离原理是什么?很多人都不知道

时间:2020-05-25 点击:186次

   凝胶色谱是以多孔凝胶为固定相,利用凝胶孔的空间尺寸效应,使不同大小的分子达到分离的一种高效液相色谱(HPLC)方法。其分离机理类似于分子筛效应,大体积分子只能渗入少量大孔,在固定相中所经历的路径较短,先流出。所有孔隙都不能进入的大体积分子,不被保留,在死体积处流出。因此,溶质按分子体积从大到小依次流出色谱柱。在凝胶色谱中,流动相只起溶解样品的作用,以有机溶剂为流动相的凝胶渗透色谱(GPC)应用较多,而以水为流动相的凝胶过滤色谱的应用相对较少,这主要是因为水溶性大分子不仅可以溶于水,通常也能溶于有机溶剂中。甲苯和二甲基甲酰胺等非极性有机溶剂是常用的流动相。在凝胶色谱中,固定相表面与溶质分子间不存在化学相互作用,即固定相是惰性多孔材料。

  gpc凝胶净化是凝胶渗透色谱主要应用的一种,是样品前处理的一种方法。
  gpc凝胶净化是一种以惰性多孔凝胶为固定相,基于尺寸排阻原理,主要依据分子尺寸大小差异使物质分离的一种高效液相色谱方法。
  gpc凝胶净化的分离原理
  一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
  大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。
  小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流出色谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最后流出。

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