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饲料中氨基酸的测定

时间:2020-04-02 点击:255次

  方法原理:
  1、酸水解法
  常规(直接)水解法是使饲料蛋白在110°C、6mol/L盐酸作用下,水解成单一氨基酸,再经离子交换色谱法分离并以茚三酮做柱后衍生测定。水解中,色氨酸全部破坏,不能测量。胱氨酸和蛋氨酸部分氧化,不能测准。氧化水解法是将饲料蛋白中的含硫氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸等)用过甲酸氧化,然后进行酸解,再经离子交换色谱分离、测定。水解中色氨酸被破坏,不能测定。酪氨酸在以偏重亚硫酸钠做氧化终止剂时,被氧化,不能测准。酪氨酸、苯丙氨酸和组氨酸则坐终止剂时被氧化,不能测准。  
  2、碱水解法
  饲料蛋白在110°C、碱的作用下水解,水解出的色氨酸可用离子交换色谱或高校反相色谱分离、测定。
  3、酸提取法
  饲料中添加的氨基酸以稀盐酸提取,再经离子交换色谱分离、测定。
  仪器、设备:
  1、实验室用样品粉碎机
  2、样品筛:孔径 0.25mm
  3、分析天平:感量0.0001g
  4、真空泵与真空规
  5、喷灯或熔焊机
  6、恒温箱或水解炉
  7、旋转蒸发器或浓缩器:可在室温至65°C间调温,控温精度±1°C,真空度可低至3.3×10三次方Pa
  8、氨基酸自动分析仪:茚三酮柱后衍生离子交换色谱仪,要求各氨基酸的分辨率>90%

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